【#美国移民# #美国移民生活常识#】在移民愈演愈烈的现代社会，美国作为一个移民大国，吸收了世界上很多国家的移民申请者。但是，不少移民者在成功移民美国之后，却很难适应美国的生活习惯，这是因为美国生活和自己原来的生活存在一定差异。下面就和®无忧考网一起来看看吧。

1.美国移民生活常识

1、美国生活习惯

交谈习惯

美国人之间的交往不多而且简单。熟人之间见面打打招呼就行了，晚上很少打电话拉家常或串门。不熟的人之间打交道，则带点小礼物表示打扰了对方聊表心意。不需要重的礼物，请人来做报告或介绍经验，轻车简从，无须接待，州交通部来介绍经验，看不出是一位高 官。

思维习惯

美国人的思维方式与我们国内有很大的区别。英文是这样表达的：1)like to be ;2)Agree to ; 3) is above board.

美国人的眼光

美国人的信条是“忘记过去展望未来”。因为他们认为过去了的事情已经没有实在意义，只有目前和将来的事情才值得花时间去做。美国人的眼光是建立在现实和实惠基础之上的。他们不喜欢听你谈论小到你个人大到你国家的历史。

卫生习惯

有一句俗话说，在美国的街道上走一个星期，皮鞋不用擦。出门不用带卫生用品和水，到处都可以见到卫生设施。房间里一般都铺上地毯，有空调设备，房屋内外装点得非常好看，周围环境整洁美观。没有人乱扔垃圾，随地吐痰。

排队习惯

美国人做事爱讲规章制度。因此，排队成了他们固有的习惯。

美国人好争论的习惯

美国人喜欢争论。他们不喜欢沉默。他们养成了凡人凡事必先争论的习惯。通过争论达成共识，达不成共识，通过举手或投票表决，少数服从多数，这也就是所谓的民主。个人价值比什么都重要。好争论的习惯使美国人养成了好冒险，富于创造性的性格。

2、美国生活常识

各种东西买的时候都收税，但每个州都有那么几天不收税。在不收税的那几天买东西，就会便宜很多;

洗衣服要直接烘干，不要在外或阳台上晾衣服、内衣内 裤等;

美国的牙医费用比较昂贵，而且还得提前预约，排很长时间。建议赴美之前做好牙齿健康检查真人百家家乐app，做窝沟封闭，避免蛀牙等;

过人行道要先按路边的按钮，待绿色指示灯闪现后，要迅速通过;

美国人看到陌生人也会打招呼或微笑示意。看到之后，要礼貌地回应，不要因为害羞躲闪对方的目光或装没看见，那样会被视为不礼貌或没教养。和亲近的人可以礼节性地拥抱;

在美国一般都是刷卡消费或者用旅行支票，要带ID卡;

电压和插头和中国不一样，充电中国电器时，需要带转换器;5、在商场购货要填写有关地址登记和E-MAIL，因为他们会给您寄打折卡。经常去的超市，可办些优惠卡;

加油站自己加油，自己付账，加油站都有擦玻璃的一套东西，包括纸等，加油时可以擦玻璃;

不要接受陌生人给的药或者糖;

请带些治疗小毛小病的药物，例如治感冒和胃肠感染的药和其他一些常用药。因为到美国药店买药，药店会很负责得检查医生处方。

2.生活指南

说话有礼貌

美国人从小就养成说话要有礼貌的习惯，在每天的日常生活中，即使与家中父母，兄弟姐妹说话，也都会使用 “ Hi ” ，“ ” 及 “ me ”，“ I am sorry ” 等客套话。

尊重个人稳私

美国是一个特别重视个人稳私的国家，美国人不会问新结识的朋友任何有关个人之经济、宗教及政治等方面的问题。体重和年龄也是他们不愿提及的话题，即使是他们很年轻或身材很好，也不要谈论。

穿合适的衣服

美国人穿衣服是因场合而异，与身份无关。所以，美国人在应邀参加应酬时，事先一定都要问清楚这个场合应该穿什么衣服。值得特别注意的是，在美国睡衣是只能在室内穿着的衣服，绝对不能穿到室外去。

称谓

美国人平常都喜欢彼此互相以名字相称，不带姓、不带先生、小姐或太太等客套的称谓。不但邻居、朋友、同学、亲戚之间如此，在办公室里同事之间，即使是上司与部属之间，亦均以名字相称。

AA制

美国人推崇AA制，不喜欢请客或被请客。和美国人一起外出时，要各付各的费用，车费、饭费、小费无不如此。

付小费

美国人在餐馆吃完饭付帐时，一定会给服务生至少消费金额15%的小费。如果服务特别好的话，则会付20%的小费，同样地去美容院或理发厅烫发、剪发，付帐时也付至少15% 的小费。美国人也会给搬运行李的、停车的或是送外卖的服务生几块钱的小费。

对陌生人友好

我们在路上、电梯内，常常与迎面走来的人打照面，目光相遇，美国人的习惯是用目光致意，互相微笑，不可立刻把视线移开，或把脸扭向一边，佯装不见。只有对不顺眼和不屑一顾的人才这样做。

平等对待孩子

美国人讲究大人、孩子一律平等，到美国人家中作客，他们的孩子也一定出来见客，打个招呼，作为客人千万不要只顾大人冷落了孩子，跟小孩子打招呼，可以握握手或亲亲脸，如果小孩子亲了你的险，你也一定要亲亲他的脸。

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免疫微环境 人人都能学会的5+生信套路！这样分析m6A和肿瘤微环境，3个月发表，毕业晋升必备！

看文献、设计课题、做实验，大家都知道现在想发一篇SCI有多难！尤其是对医生、医学生来说，没有SCI就是无法晋升，毕不了业，可以说寸步难行！这不，小记者发现了一篇很适合医生和医学生的文章，赶紧来和大家分享了！经常看文献的小伙伴们都知道m6A和肿瘤免疫微环境都是当前研究的热点，但是如何以性价比最高的方式发一篇SCI着实难倒了一大批人。小记者今天介绍的这篇文章——垂体腺瘤免疫微环境m6 A亚型分型的综合分析，不到3个月就发表，而且主打的就是一个朴实无华，分析过程和实验都很简单，换个肿瘤就可以复现啦！（ps：小记者持续报道新鲜出炉的生信热点方向，帮大家找创新思路！）接下来赶快来学习一下吧！

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研究背景

垂体腺瘤( , PAs)约占颅内肿瘤的10%，可引起严重并发症甚至死亡。迫切需要揭示PAs的发生、发展和耐药机制，开发安全有效的替代治疗方法，改善预后。近年来，癌症免疫治疗取得了巨大进展，发现N6 -甲基腺苷(m6A) RNA甲基化和肿瘤免疫微环境(IME)在肿瘤发生发展中具有重要作用。然而，它们在垂体腺瘤(PAs)中的关系尚不清楚。

数据来源

利用基于m6A调控基因集的分层聚类算法来识别m6A亚型，识别两组间差异表达基因(DEGs)，并进行GO和KEGG分析。然后比较了A、B两个亚型的临床特征，采用“TIDE”预测两亚型对免疫治疗的应答，利用“GSVA”R包计算两个亚型生物功能评分和各自的m6A ，使用“”和评估免疫细胞组成情况。建立了一种模型来预测PAs的亚型。采用免疫组织化学和多重免疫荧光染色分析m6A调节因子在PAs中与M2巨噬细胞和免疫检查点的表达水平。

主要结果

1. PAs基于m6A的免疫分类

合并多个数据集，使用“sva”R包对表达数据进行批量归一化处理。基于合并数据集中278个PA阵列中的19个m6A调节因子进行分层聚类分析。并且确定了两种不同的m6A亚型(集群A和集群B)(图1A)。此外，基于m6A调节因子进行主成分分析(PCA)，发现这两种m6A亚型具有明显的区别(图1B)。与正常垂体和A型亚型相比，B型亚型中有一些m6A调节因子表达水平升高，包括、FTO、CBLL1、、、、、WTAP、、、、和(图1C)。而、、和在PAs中明显降低(图1C)。

图1 PAs基于m6A的免疫分类

2. A、B亚型的临床特征、免疫应答和生物功能

比较A类和B类PAs亚型的临床特征，累积条形图显示了A类和B类PAs亚型的总手术完成率、蝶/海绵窝侵犯和视力缺损发生率、USP8/GNAS突变频率(图2 A、B)；采用肿瘤免疫功能障碍和排斥(Tumor and , TIDE)算法预测免疫检查点阻断应答。累积条形图显示，A类PAs(61.74%，92/149)对免疫治疗的应答率高于B类PAs(45.74%，59/129)（图2 C）；使用分析生物功能的富集情况,结果显示与B亚型相比，组蛋白修饰，致瘤细胞因子，增殖，有丝分裂CIN吸引子、血管生成、淋巴细胞特异性吸引和干细胞维持在A亚型中明显富集，而B亚型的抗凋亡生物学功能显著增强（图2 D）。

图2 A、B亚型的临床特征、免疫应答和生物功能

3. A、B亚型的m6A score比较

在合并的数据集中真人百家家乐app，结果显示，与正常垂体相比，PAs的m6 A score较低， score和 score较高(Fig. 3A-B)，B亚型比A亚型具有更高的m6 A score和 score(图3A-B),在垂体的各个类型的细胞中也有着相同的情况(图3C)。

图3A、B亚型的m6A score比较

4. A、B亚型的免疫细胞组成比较

用R包“”估计基质细胞和免疫细胞的比例。结果显示，与正常垂体和集群B亚型相比，集群A亚型PAs具有更高的基质评分和免疫评分(图4A)。采用检测肿瘤浸润免疫细胞的百分比，结果显示，与正常垂体相比，PAs中Tregs、γ δ-t细胞和中性粒细胞的百分比显著升高。集群A亚型中单核细胞、CD4 naïve t细胞和M2巨噬细胞的比例高于集群B亚型(图4B)。我们进一步观察到免疫检查点分子( , ICMs) (PD-L1, CD276, CTLA4, TIM3, CD40等)在 B亚型中的表达明显高于正常垂体和 A亚型(图4C)。

图4 A、B亚型的免疫细胞组成比较

5. PAs中A和B亚型的富集分析

采用 ( /)在线软件，用P值(<0.01)和FDR(<0.01)标准测定两组间差异表达基因(DEGs)，然后进行GO和KEGG分析，富集分析结果显示，A类亚型的19个DEGs主要映射到细胞激素代谢过程和糖蛋白代谢过程(图5A-B)。而B亚型主要与抗原加工和递呈、自噬的正向调节、T细胞受体信号通路和AMPK信号通路有关(图5C-D)。

图5 PAs中A和B亚型的富集分析

6. 分类预测模型的构建

在合并的数据集中，作者发现集群A和集群B亚型之间存在3033个DEGs (图6A)。作者通过LASSO和回归分析筛选了最佳预测基因组合，曲线下面积(AUC)最高的变量组合被确定为最佳预测基因。包括、DHX57、、和DSCAM(图6B-D)。然后，作者使用“rms”R包构建了一个预测PAs的m6A亚型分类的多基因模型(图6F)。采用“pROC”R包计算受试者工作特征(ROC)曲线，衡量模型的预测性能。采用“”R软件包进行决策曲线分析( , DCA)，评估模型的临床净决策收益。训练数据集包括GEO和E-MTAB的数据集。作者还只用E-MTAB数据集验证了模型。结果来看，训练AUC = 0.984，验证AUC = 0.986， (图6E)。DCA结果显示，模型满足临床净收益(图6G)。

7. 在PAs中的表达特征及其与IME的关系

表达谱显示，与正常垂体和A亚型相比，在B亚型中高表达(图7A)。此外，富集分析表明，与正相关的基因( |R| > 0.5)主要与RNA修饰、自噬、先天免疫反应、NF-信号传导和抗原加工和递呈有关(图7B)。此外，结果显示，与低表达组相比，高表达组的B细胞记忆、T细胞滤泡辅助、M2巨噬细胞、树突状细胞静止和中性粒细胞的百分比明显更高(图7C)。作者还发现，与低表达组相比，高表达组中ICMs (ARG1、PD-L1、CD276、CD27、CD40等)的表达明显增加(图7C)。TIDE结果显示，与表达极低的患者(70.59%，48/68)相比，表达极高的PAs(22.06%，15/38)更容易对免疫治疗产生反应(图7D)。

图 of in PAs and its with the IME.

8.、PD-L1和CD206在PAs中的表达特征及其相互关系

为了验证与M2巨噬细胞(CD206 +)和ICMs呈正相关，作者利用3例PAs患者的垂体和3例非肿瘤患者的垂体病理切片，进行了免疫组织化学分析和多重免疫荧光染色分析。免疫组织化学分析显示，与正常对照相比，、PD-L1和CD206在PAs中高表达(图8A)。此外，多重免疫荧光染色分析也表明，与正常对照相比，PAs中、PDL1和M2巨噬细胞更丰富，并且存在和PD-L1共表达的特征(图8B)。

图8 、PD-L1和CD206在PAs中的表达特征及其相互关系

文章小结

这篇文章的特点在于内容扎实，虽然选材不算特别新颖，但是作者从临床上观察到的现象出发，文献调研充分，数据量较多，分析过程逻辑严谨，并且有实验进行佐证，得到的结论较有临床价值。这样的文章没有特别华丽、特别创新的思路，非常值得初学者模仿，感兴趣的朋友，码住这个思路行动起来吧！

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